تستCAMP

–  هدف :

شناسایی و افتراق استرپتوکوک گروه B ( آگالاکتیه ) از سایر استرپتوکوکها

 

۲-  اساس آزمایش :

استرپتوکوک گروه B پروتئین خارج سلولی به نام CAMP factor  ترشح می نماید که با بتا لیزین استافیلوکوک ارئوس بصوررت سینرژیک عمل نموده وسبب افزایش لیز گلبول های قرمز خون می شود.

• حساسیت این تست بسیار بالا است و حتی سویه های بدون همولیز استرپتوکوک گروه B (در۱۱ %  موارد )، CAMP مثبت می باشند.

 

۳-  نمونه اولیه :

 – کشت تازه میکروبی ( ۲۴-۱۸ ساعته )

۴- مواد و ابزار لازم :

• پلیت بلاد آگار حاوی ۵% خون گوسفند
• استاف اورئوس بتا همولیتیک ATCC (25923 ) یا استاف اورئوس بتا همولیتیک جدا شده از بیمار

 

۵-  روش انجام کار  :

• ابتدا در وسط پلیت بلادآگار یک خط مستقیم از استاف اورئوس مولد بتا لیزین راکشت می دهیم.
• سپس استرپتوکوک مورد نظر را عمود بر خط کشت استاف ارئوس کشت داده بطوریکه این دو با هم برخورد و تداخل نکنند. (می توان چند میکروار گانیسم را به فاصله ۴-۳میلیمتر کشت داد.)
• پلیت را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در اتوو C ‍۳۵^۰ در حضور O₂ انکوبه می نماییم.
• مشاهده همولیز بتا، شبیه نوک فلش، در محلی که دوسویه استاف اورئوس و سویه مشکوک به هم نزدیک می شوند، نشان دهنده تشدید همولیز بتا و تست CAMP مثبت  است.

 

۶-تداخلات :

اگر پلیت تست در کندل جار یا اتو CO₂ و یا در شرایط بی هوازی انکوبه شود بعضی از استرپتوکوک های گروه A ایجاد واکنش CAMP مثبت می کنند، بنابراین پلیت تست، باید حتماً در حضور O₂ اتوو گذاری شود.

۷-  برنامه  QC  :

سویه کنترل مثبت  : استرپتوکوک گروه B

سویه کنترل منفی  : استرپتوکوک گروه A و استرپتوکوک Bovis